搜索全部
  • 產品中心
  • 專項研究
  • 資料下載
免費咨詢電話:

400-627-9288

慢病毒

AAV

腺病毒

穩定株構建

質粒構建

Cas9

檢測實驗

技術服務> 慢病毒
Easy RNAi慢病毒構建與包裝

服務簡介:

RNA干擾(RNA interference, RNAi) 是一種進化上保守的抵御轉基因或外來病毒侵犯的防御機制。將與靶基因的轉錄產物mRNA存在同源互補序列的雙鏈RNA(double strand RNA, dsRNA) 導入細胞后,能特異性地降解該mRNA,從而產生相應的功能表型缺失。RNAi提供了一種經濟、快捷、高效的抑制特異基因表達的技術手段,有助于研究該基因在生物模型系統中的作用,是研究基因功能的重要工具,并且逐步成為病毒性疾病、遺傳性疾病以及腫瘤等的基因治療研究的一種手段?,F今發現的主要起干擾作用的RNAi主要有兩類小分子RNA:一類是microRNA(miRNA);另一類是siRNA (small interfering RNA)。

siRNA制備的方法一般有:化學合成siRNA,哺乳動物細胞載體shRNA克隆和慢病毒載體shRNA克隆。

與化學合成siRNA和基于瞬時表達載體構建的shRNA相比,利用慢病毒構建的shRNA:一方面可以擴增瞬時表達的載體使用,另一方面,lentivirus-shRNA克隆經過慢病毒包裝系統包裝后,可用于感染傳統轉染試劑難于轉染的細胞系如原代細胞,懸浮細胞和處于非分裂狀態的細胞,并且在感染后可以整合到受感染細胞的基因組,進行長時間的穩定表達。

吉滿生物科技(上海)有限公司主要提供以慢病毒為主的應用于臨床前細胞學實驗和整體動物實驗的針對不同基因和藥物靶標的各種即用型病毒顆粒。利用相關載體把shRNA導入細胞,載體中的U6啟動子確保shRNA表達;這種裝載了shRNA載體可被傳遞到子代細胞中去,從而使基因的沉默是可遺傳的。

表1.各種siRNA制備方法比較

比較項目 化學合成siRNA DNA載體shRNA Lentiviral-shRNA
siRNA結構 雙鏈RNA或發夾結構RNA 發夾結構RNA 發夾結構RNA
RNA干擾持續時間 <72小時 <10天 >30天
適合的細胞系 轉染效率大于70%的細胞 轉染效率大于20%但是可以傳代的細胞 幾乎所有細胞
單次制備費用
重復使用費用
是否可自行擴增 不可以 可以 不可以
構建穩定表達siRNA的細胞株 不滿足 滿足,但有風險 滿足,可以同時制備多種穩定表達細胞系
組織特異性干擾實驗 不滿足 滿足 滿足
干細胞分化實驗 不滿足 不滿足 滿足
裸鼠荷瘤實驗 低重復性 低重復性 高重復性
轉基因knockdown實驗 不滿足 不滿足 滿足


推薦使用:

1.適用于在難以轉染的細胞中進行的RNA干擾研究,如原代神經細胞,干細胞,腫瘤細胞等;
2.適用于快速建立穩定表達沉默特定基因的細胞株;
3.適用于In vivo 實驗,包括穩定表達細胞株成瘤實驗、局部注射等;
4.適用于轉基因動物,特別是轉基因大鼠的制備。


服務流程:


其它相關服務:

1.AAV腺相關病毒包裝;
2.穩定細胞系構建;
3.cas9敲除細胞系構建。


登錄

還沒有帳號 注冊

注冊

<返回登錄
内蒙古快三今日快三